深夜的校園萬(wàn)籟俱寂，廈門(mén)大學(xué)橢圓樓內(nèi)卻燈火通明——這是國(guó)家傳染病診斷試劑與疫苗工程技術(shù)研究中心普通的一天。每周工作6天、每天工作超過(guò)12小時(shí)，是夏寧邵教授和團(tuán)隊(duì)成員的工作常態(tài)。他們爭(zhēng)分奪秒地工作，一項(xiàng)重要任務(wù)就是和HPV（人乳頭瘤病毒）賽跑。
談及HPV，相信許多人并不陌生。宮頸癌威脅女性健康，持續(xù)的HPV感染是這一疾病的核心誘因。很長(zhǎng)一段時(shí)間，盡管HPV疫苗已經(jīng)問(wèn)世，但受制于進(jìn)口疫苗的壟斷價(jià)格和有限的供應(yīng)量，國(guó)內(nèi)普及率一直很低。
2019年，由夏寧邵團(tuán)隊(duì)聯(lián)合萬(wàn)泰生物研制的首支國(guó)產(chǎn)HPV疫苗（俗稱宮頸癌疫苗）馨可寧上市，打破了進(jìn)口疫苗長(zhǎng)期壟斷的局面，使中國(guó)成為繼美國(guó)和英國(guó)之后，世界上第3個(gè)實(shí)現(xiàn)宮頸癌疫苗獨(dú)立供應(yīng)的國(guó)家。更為難得的是，接種國(guó)產(chǎn)HPV疫苗3針總費(fèi)用僅為進(jìn)口疫苗價(jià)格的一半多。
鎖定大腸桿菌生產(chǎn)人用疫苗
這場(chǎng)歷時(shí)18年的疫苗攻堅(jiān)戰(zhàn)，步步艱辛。
此前，世界主流基因工程疫苗采用酵母細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞等真核細(xì)胞作為制備疫苗的表達(dá)系統(tǒng)，因?yàn)樗鼈兣c人體細(xì)胞結(jié)構(gòu)接近，在技術(shù)上便于對(duì)感染人類病原體進(jìn)行基因表達(dá)和蛋白修飾。
但這一方法技術(shù)壁壘高，核心技術(shù)被國(guó)外壟斷。該怎樣獨(dú)辟蹊徑、突出重圍？
無(wú)數(shù)次嘗試，無(wú)數(shù)次失敗。夏寧邵團(tuán)隊(duì)通過(guò)大量反復(fù)實(shí)驗(yàn)，終于尋覓到成功的一線之機(jī)，他們將目光瞄向了一種人們耳熟能詳?shù)募?xì)菌——大腸桿菌。
“與仿制藥不同，我們開(kāi)辟了一條全新的技術(shù)線路。它不僅繞過(guò)國(guó)際制藥巨頭的專利壁壘，還為全世界疫苗研究和生產(chǎn)貢獻(xiàn)出一種質(zhì)優(yōu)價(jià)廉的選擇。”談到馨可寧的創(chuàng)新之處，疫苗研制團(tuán)隊(duì)主要成員、廈門(mén)大學(xué)國(guó)家傳染病診斷試劑與疫苗工程技術(shù)研究中心副主任張軍自豪地告訴科技日?qǐng)?bào)記者。
團(tuán)隊(duì)在疫苗方面取得突破的關(guān)鍵是將大腸桿菌作為人用疫苗生產(chǎn)的工程細(xì)胞，在全球首創(chuàng)出原核表達(dá)類病毒顆粒疫苗技術(shù)體系。張軍介紹，大腸桿菌作為表達(dá)系統(tǒng)具備獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，制備簡(jiǎn)單、成本低廉，雖然研發(fā)階段門(mén)檻很高，但是一旦實(shí)現(xiàn)技術(shù)突破，易于大規(guī)模復(fù)制生產(chǎn)，能大大提高疫苗的可及性。
疫苗研制初期，學(xué)術(shù)界、工業(yè)界不少人用懷疑的眼光看待夏寧邵團(tuán)隊(duì)從事的研究，特別是得知他們要用大腸桿菌表達(dá)復(fù)雜的HPV蛋白，認(rèn)為“幾乎不可能”。
“創(chuàng)新一定是走前人沒(méi)有走過(guò)的路。當(dāng)然，我們的堅(jiān)持也不是盲目的，一系列符合預(yù)期的前期實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，增強(qiáng)了我們沿著這條線路走下去的決心。”張軍說(shuō)。
每個(gè)環(huán)節(jié)都經(jīng)歷無(wú)數(shù)次試錯(cuò)
大腸桿菌究竟能不能用于生產(chǎn)人用疫苗？這是讓團(tuán)隊(duì)備受質(zhì)疑的根本性問(wèn)題。
重組蛋白表達(dá)是基因工程疫苗生產(chǎn)工藝中關(guān)鍵的一環(huán)。研究人員要將帶有一段病原體的基因片段轉(zhuǎn)入合適的細(xì)胞中，使之表達(dá)蛋白抗原，純化后制得疫苗。
大腸桿菌是原核生物，后期基因修飾和蛋白純化復(fù)性的難度很高。
HPV型別有上百種，蛋白結(jié)構(gòu)復(fù)雜。通過(guò)大腸桿菌表達(dá)后的抗原需要組裝成類似于天然病毒的類病毒顆粒，才能發(fā)揮疫苗的作用。制備該抗原的關(guān)鍵是要對(duì)候選抗原蛋白的多個(gè)半胱氨酸殘基精準(zhǔn)配對(duì)，并形成正確的二硫鍵以及構(gòu)象正確的五聚體。團(tuán)隊(duì)整整摸索了15年，才突破從候選抗原蛋白到類病毒顆粒的全鏈條關(guān)鍵技術(shù)。
團(tuán)隊(duì)成員李少偉回憶，在疫苗攻堅(jiān)階段，他們花了幾個(gè)月時(shí)間，從廈門(mén)一家醫(yī)院的宮頸病變患者身上克隆到用于疫苗研發(fā)的HPV L1基因，隨后在大腸桿菌中表達(dá)獲得了HPV類病毒顆粒，取得重大進(jìn)展。但在疫苗工藝開(kāi)發(fā)過(guò)程中，遇到其中一“價(jià)”的生產(chǎn)工藝難題。參與研究的學(xué)生卡在關(guān)鍵點(diǎn)上，“崩潰落淚”，而后又“默默收起情緒”，繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。
“在最初幾年，我們團(tuán)隊(duì)很少有重磅的論文發(fā)出，但大家都不計(jì)個(gè)人得失，心甘情愿地付出。”張軍介紹，基于嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和科學(xué)論證，團(tuán)隊(duì)屏蔽“雜音”，靜心鉆研，堅(jiān)持利用大腸桿菌原核細(xì)胞系統(tǒng)作為研究對(duì)象。
“疫苗研制階段，每個(gè)環(huán)節(jié)都經(jīng)歷了無(wú)數(shù)次試錯(cuò)，大家沮喪、失落，再重整旗鼓。創(chuàng)新沒(méi)有神話，唯有拿出堅(jiān)實(shí)的科學(xué)數(shù)據(jù)，真正解決技術(shù)問(wèn)題，才能贏得同行的認(rèn)可。”張軍說(shuō)。
首支走出國(guó)門(mén)的HPV疫苗
橢圓樓者，“進(jìn)取”之謂也，“創(chuàng)新”之謂也。
上萬(wàn)名志愿者、醫(yī)務(wù)人員、研究者參與，上萬(wàn)次實(shí)驗(yàn)、失敗再嘗試……就這樣，HPV疫苗從立項(xiàng)研制到最終上市，走過(guò)了18個(gè)春秋。
如今，馨可寧不僅實(shí)現(xiàn)了國(guó)內(nèi)量產(chǎn)，還獲得世界衛(wèi)生組織PQ認(rèn)證和摩洛哥、尼泊爾的上市許可，成為首支走出國(guó)門(mén)的HPV疫苗。基于這套自主創(chuàng)新的技術(shù)線路，中國(guó)有望在未來(lái)研制更多更為復(fù)雜的疫苗。
夏寧邵帶領(lǐng)團(tuán)隊(duì)不斷突破重重技術(shù)挑戰(zhàn)。回首走過(guò)的路，每一支疫苗的研發(fā)過(guò)程都跨越10年以上，但團(tuán)隊(duì)的腳步從未停歇。
“進(jìn)口疫苗價(jià)格昂貴，質(zhì)優(yōu)價(jià)廉的國(guó)產(chǎn)HPV疫苗是我國(guó)重大的民生需求。”夏寧邵表示，“也許有人認(rèn)為我們總能把握住前沿方向，但我們現(xiàn)有的成果依靠的不是天賦，而是耐心與毅力。”
眼下，第二代九價(jià)宮頸癌疫苗正開(kāi)展Ⅲ期臨床試驗(yàn)，第三代宮頸癌疫苗（二十價(jià)）已實(shí)現(xiàn)技術(shù)突破……
黨的二十大報(bào)告提出，堅(jiān)持面向世界科技前沿、面向經(jīng)濟(jì)主戰(zhàn)場(chǎng)、面向國(guó)家重大需求、面向人民生命健康，加快實(shí)現(xiàn)高水平科技自立自強(qiáng)。“面向國(guó)家重大需求、面向人民生命健康，是我們團(tuán)隊(duì)始終如一的科研初心。”談起下一步的打算，夏寧邵說(shuō)，“創(chuàng)新之路有許多種選擇方向，我們選擇的每個(gè)項(xiàng)目都會(huì)是持久戰(zhàn)。支撐我們的精神信仰，是為人民群眾謀求健康福祉的理想，以及對(duì)病毒免疫之路的不竭探索！”
